固相萃取
- 2017-01-06 11:22:07
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- 最后編輯：逗點(diǎn)生物 于 2020-06-03 10:33:05
固相萃取柱（SPE 柱）常用問答
固相萃取柱規(guī)格的選擇骤宣，上樣量與洗脫體積如何確定秦爆？
對(duì)于反相、正相和吸附型固相萃取柱來說涯雅，被萃取樣品的質(zhì)量不超SPE柱填料的5%鲜结；離子交換型的固相萃取柱，必須考慮離子交換的容量活逆。
| 規(guī)格 | 最大上樣量 | 最小洗脫體積 |
|---|---|---|
| 100mg/1mL | 5mg | 250μL |
| 200mg/3mL | 10mg | 500μL |
| 500mg/6mL | 25mg | 1.2mL |
| 1g/6mL | 50mg | 2.4mL |
常見問題及解決方法
| 出現(xiàn)問題 | 可能原因 | 解決辦法 |
|---|---|---|
| 回收率低 | 柱子類型選擇不當(dāng) | 選擇對(duì)目標(biāo)組分具有更強(qiáng)選擇性的SPE柱 |
| 柱子活化不當(dāng) | 正相填料： 正己烷等蔗候，1-3倍柱床體積怒允。 離子交換填料： 甲醇、乙腈或異丙醇等與水互溶的極性溶劑矫撤，1倍柱床體積 |
|
| 洗脫溶劑選擇不當(dāng) | 選擇極性更強(qiáng)的溶劑進(jìn)行洗脫 | |
| 洗脫不完全 | 增加洗脫的溶劑用量 | |
| 是否過載 | 選擇更大的SPE柱或減少上樣量 | |
| 重現(xiàn)性差 | 上樣前柱子出現(xiàn)干涸 | 重新活化SPE柱 |
| 洗脫液流速過快 | 控制洗脫液流速思袋，≤1mL/min | |
| 目標(biāo)物發(fā)生降解 | 選擇合適SPE柱或加入適當(dāng)?shù)木彌_液保證目標(biāo)物的穩(wěn)定性 | |
| SPE柱過載 | 選擇更大的SPE柱或減少上樣量 | |
| 淋洗溶劑洗脫能力過強(qiáng) | 降低淋洗溶液強(qiáng)度 | |
| 雜質(zhì)過多 | 雜質(zhì)與目標(biāo)物同時(shí)被洗脫 | 選擇合適的淋洗液，洗脫之前先去除雜質(zhì) 選擇對(duì)目標(biāo)組分專屬更強(qiáng)的SPE柱 |
| 雜質(zhì)來自SPE柱 | 活化前先用洗脫液沖洗柱子 | |
| SPE柱流速過 慢或堵塞 | 樣品存在較多不溶物 | 上樣前對(duì)樣品進(jìn)行離心或選擇溶解度更大的溶劑 |
| 樣品黏度過大 | 對(duì)樣品進(jìn)行稀釋或選擇溶解度更大的溶劑 |
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